铁棒锤化学成分的HSCCC制备分离及抗氧化活性研究

NWIPB OpenIR

	铁棒锤化学成分的HSCCC制备分离及抗氧化活性研究
	刘永玲
	2014-05
摘要	铁棒锤来源于毛茛科乌头属植物铁棒锤Aconitum pendulum Busch和伏毛铁棒锤Aconitum flavum Hand.-Mazz.的干燥块根和幼苗，现代研究表明铁棒锤具有解热、消炎、镇痛、局麻和抑菌作用，在西北地区民间广泛应用于治疗跌打肿痛、风湿关节痛、外伤出血等症状，发挥了良好的治疗作用。铁棒锤根和根茎中含生物碱类和黄酮类活性成分，具有很高的药用价值。本学位论文主要进行了铁棒锤（Aconitum pendulum Busch）化学成分的高速逆流色谱（HSCCC）分离制备、提取工艺优化及HPLC-DPPH抗氧化活性研究，取得了以下研究成果和结论： 1. 在单因素实验的基础上，选择液料比、提取温度、提取时间3个因素为自变量，以铁棒锤根中一种咪唑生物碱（ICABE）的提取率作为响应值，采用3因素3水平的响应面分析法，优化了铁棒锤乙醇超声提取工艺：液料比23.0 mL/g，提取温度为58 ℃，提取时间为51 min。 2. 采用HSCCC技术从铁棒锤根的氯仿萃取部分分离得到1个化合物，经1H-NMR、13C-NMR等波谱学数据分析鉴定为一种咪唑生物碱1H-Imidazole-2- carboxylic acid, butyl ester（ICABE）。 3. 采用大孔树脂粗分结合HPLC-DPPH方法快速筛选铁棒锤地上部分的抗氧化活性部位及成分。结果表明：大孔树脂水、10 %乙醇、30 %乙醇和50 %乙醇四个洗脱部位中，30 %乙醇部位对DPPH˙的抑制率最高，其中化合物（4）抗氧化性显著。此方法省时省力、操作简单易控、响应快速准确，具有良好的重现性。 4. 采用大孔树脂富集、HSCCC分离制备结合半制备色谱（semi-prep-HPLC）从铁棒锤地上部分粗提物大孔树脂预处理30 %乙醇洗脱部分中分离纯化了8种单体化合物，经1H-NMR和13C-NMR等波谱学数据分析鉴定为：木兰花碱（1）、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖基-3-O-β-D-葡萄糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（2）、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖基-3-O-(6′′′′-反式咖啡酰基)-β-D-葡萄糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（4）、山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖基-3-O-(6′′′′-反式咖啡酰基)-β-D-葡萄糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（5）、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖基-3-O-(6′′′′-反式对香豆酰基)-β-D-葡萄糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（6）、山奈酚7-O-α-L-鼠李糖基-3-O-(6′′′′-反式对香豆酰基)-β-D-葡萄糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（7）、山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖基-3-O-β-D-葡萄糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷（8），羟基酪醇-1-O-(6′-反式阿魏酰基-(4′′→1′′′)-β-D-葡萄糖基)-β-D-葡萄糖苷（9）。经HPLC检测纯度分别为97. 2 %（1）、95.7%（2）、96.4 %（4）、97.2%（5）、98.6 %（6）、96.8 %（7）、98.8 %（8）和93.9 %（9）。该方法简便、快速，所得产物纯度高，适合于铁棒锤地上部分化学成分的制备分离。 5. 通过DPPH˙分光光度计法测定了铁棒锤地上部分分离得到的黄酮苷类化合物2、4、5、6、7和8的清除自由基能力。结果表明：化合物4和5清除DPPH˙自由基能力较强，其IC50值为16.92 μg/mL和27.23 μg/mL。
文献类型	学位论文
条目标识符	http://210.75.249.4/handle/363003/16806
专题	中国科学院西北高原生物研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	刘永玲. 铁棒锤化学成分的HSCCC制备分离及抗氧化活性研究[D],2014.