Knowledge Management System of Northwest Institute of Plateau Biology, CAS
| 黑果枸杞ISSR-PCR反应体系的正交设计优化 | |
| 钱前 ; 王钧 ; 王莉 ; 李毅 ; 胡延萍 | |
| 2018 | |
| 发表期刊 | 分子植物育种
 |
| 摘要 | 黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)为茄科枸杞属小灌木。果实为黑紫色球形浆果,具有较高的药用价值、营养价值、生态价值和经济价值。该研究以青海省野生黑果枸杞为材料,将对黑果枸杞ISSR-PCR反应产生主要影响的五种因子(Taq DNA聚合酶, dNTP, Mg~(2+),引物和模板DNA)进行L_(16)(4~5)的正交试验,以建立黑果枸杞ISSR-PCR最佳反应体系,并对反应体系进行验证。在此基础上筛选出适宜的ISSR引物,用梯度法优化各引物的最佳退火温度。结果表明:黑果枸杞20μL ISSR-PCR反应体系中包括Taq DNA聚合酶0.02 U/20μL,Mg~(2+) 1.65 mmol/L,dNTP 0.15 mmol/L,引物0.60μmol/L和模板DNA 50 ng;在100条ISSR引物中筛选出16条最适引物,并确定了各引物的最适退火温度为44℃～54.5℃;最佳扩增程序设定为94℃预变性5 min;然后94℃变性20 s,44℃～54.5℃复性1 min,72℃延伸1 min 20 s,共进行38个循环;最后72℃延伸6 min,4℃保存。该体系在黑果枸杞不同样品中所得条带清晰且多态性丰富,有助于后续青海省黑果枸杞种质资源筛选和遗传多样性分析研究。 |
| 文献类型 | 期刊论文 |
| 条目标识符 | http://210.75.249.4/handle/363003/34095 |
| 专题 | 中国科学院西北高原生物研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 钱前,王钧,王莉,等. 黑果枸杞ISSR-PCR反应体系的正交设计优化[J]. 分子植物育种,2018. |
| APA | 钱前,王钧,王莉,李毅,&胡延萍.(2018).黑果枸杞ISSR-PCR反应体系的正交设计优化.分子植物育种. |
| MLA | 钱前,et al."黑果枸杞ISSR-PCR反应体系的正交设计优化".分子植物育种 (2018). |
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