Knowledge Management System of Northwest Institute of Plateau Biology, CAS
红景天化学成分在生物基质中的检测及药代动力学研究 | |
陈光 | |
2013 | |
摘要 | 红景天属植物为著名药材,其活性成分具有抑癌、抑亢补虚、抗诱变等作用。然而,虽然出现若干有关红景天的研究,但关于其活性成分在活体中代谢的研究甚少,分析方法方面的研究比较薄弱。并且,现有生物基质的样品处理及痕量检测方法均存在较大缺限,如取血量大操作困难、灵敏度低、实验时间长、检测通量低等实际问题。结合本领域研究现状,针对存在的问题,本论文对红景天属植物及其相关产品中活性物质的检测方法及在代谢中的应用进行了研究,主要研究内容及结果如下: 1.论文首先基于衍生增敏技术,针对目前红景天苷、酪醇、三萜酸、氨基酸、脂肪酸等分析方法的不足,合成了3种荧光标记试剂,包括EASC(10-ethyl-acridine-3-sulfonyl chloride)、PBIOTS(2-(2-(pyren-1-yl)-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)-ethyl-p-toluenesulfonate)与BCETS(1,2-benzo-carbazole-9-ethyl-p-toluenesulfonate)。建立了红景天苷、酪醇、三萜酸、氨基酸、脂肪酸的4种分析方法,基于GC-MS, MD-ICP-MS技术,建立了挥发油、微量元素的2种分析方法。结果表明方法在样品处理、灵敏度、操作时间、基质影响、检测效率等方面有较为显著的突破。 2.对药材、产品、血样一系列样品中的红景天苷和酪醇进行了检测,首次使用人工神经网络法接合遗传算法(ANN-GA)对衍生条件进行优化,并与响应面法进行比较。衍生条件以多原则和非参数测试方法进行评价,获得了较低的检测限(0.6 and 0.8 ng/mL)。提出了反应物浓度限(LORC)的概念,并且其较低的值(2.0-2.7 ng/mL)为微量样品(<50 μL)中的痕量待测物检测提供了保证。且单次实验可在25分钟内完成,提高了实验效率和通量。 3.建立了一种同时测定药材和血液样品中的7种三萜酸的灵敏、高效的方法。实验中血液用量少,整个实验工作可在26分钟内快速完成。7种三萜酸可由逆相Akasil-C18 column在30分钟内快速分离,经荧光检测定量并由在线离子阱质谱在大气压化学电离模式下进一步确认。方法获得了较低的检测限(0.67~1.08 ng/mL),保证了痕量分析的可行性。 4.建立了超声辅助衍生微量萃取的方法,并对药材、血样中的20种氨基酸进行了研究。本方法仅需借助普通色谱柱即可使药材、血液样品内20种氨基酸的分析检测在35分钟内快速完成,并且该方法给出了较低的定量限LLOQ (0.21~5.43 nmol/L) 5.脂肪酸进行标记,建立了在20分钟内快速分离21种脂肪酸的方法,并通过对衍生条件的优化,使方法的灵敏度得到提高(LOD:0.37~1.36 ng /mL(S/N=3),LOQ:1.03~3.67 ng/mL),保留时间、峰面积的相对标准偏差RSD分别处于0.01 %~0.05 % 和1.02 %~2.06 % 范围内, 回收率在93.3% ~103.7 % 范围内,相对标准偏差在1.0~2.6 %之间,线性相关系数均大于0.9991,保证了痕量脂肪酸的准确分析。 6.利用所建立的方法分析了4种活性较高的药用红景天(大花红景天Rhodiola crenulata、狭叶红景天Rhodiola kirilowii、圣地红景天Rhodiola sacra、高山红景天Rhodiola cretinii subsp. sino-alpina)及上市的几种药用产品(红景天胶囊、红景天含片、红景天口服液)样品, 证明了的建立方法的优点与实用性。 以BCETS(2-(11H-苯[a]咔唑)乙基对甲苯磺酸酯)为衍生试剂对红景天药材中的游离 |
文献类型 | 学位论文 |
条目标识符 | http://210.75.249.4/handle/363003/57479 |
专题 | 中国科学院西北高原生物研究所 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 陈光. 红景天化学成分在生物基质中的检测及药代动力学研究[D],2013. |
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