NWIPB OpenIR
青海湖裸鲤IL-8的原核表达及诱导条件优化
马德昭; 田菲; 吴其中; 刘思嘉; 赵凯
2019
Source Publication基因组学与应用生物学
Pages7
Abstract白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)是一种CXC家族趋化因子,主要通过趋化炎症细胞参与机体免疫反应。本研究通过RT-PCR技术,扩增得到含一对酶切位点的青海湖裸鲤IL-8成熟蛋白DNA序列(gp I L-8),经酶切连接至pET30a(+)质粒得到原核表达重组质粒pET30a-gpIL-8,将重组质粒转化入大肠杆菌B L21后成功诱导得到分子量约13.7kD的重组蛋白,重组蛋白以包涵体和可溶性蛋白两种形式存在。对影响蛋白表达量的诱导物浓度和诱导时间进行优化,发现包涵体重组蛋白表达量随诱导时间增加而增加,随诱导物浓度增加呈先增加后减少的趋势,在0.4mmol/LIPTG诱导8h时表达量最高。可溶性重组蛋白表达量总体上随诱导时间的增加呈先增加后减少趋势,随诱导物浓度的增加表达量无明显改变,在0.4mmo l/LIPTG诱导6h时即可表达高浓度的可溶性重组蛋白。因可溶性蛋白有利于后续实验,利用最佳诱导条件诱导后对可溶性蛋白进行纯化,得到高纯度的IL-8重组蛋白,测得浓度达101.5μg/mL,满足后续实验要求。本研究为青海湖裸鲤IL-8多克隆抗体制备,及其功能、作用机制研究提供了理论依据。
Keyword青海湖裸鲤 IL-8 原核表达 诱导条件优化
Document Type期刊论文
Identifierhttp://210.75.249.4/handle/363003/60651
Collection中国科学院西北高原生物研究所
Recommended Citation
GB/T 7714
马德昭,田菲,吴其中,等. 青海湖裸鲤IL-8的原核表达及诱导条件优化[J]. 基因组学与应用生物学,2019:7.
APA 马德昭,田菲,吴其中,刘思嘉,&赵凯.(2019).青海湖裸鲤IL-8的原核表达及诱导条件优化.基因组学与应用生物学,7.
MLA 马德昭,et al."青海湖裸鲤IL-8的原核表达及诱导条件优化".基因组学与应用生物学 (2019):7.
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