胡芦巴叶黄酮组分的制备、表征及其对肝细胞氧化损伤的保护作用

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	胡芦巴叶黄酮组分的制备、表征及其对肝细胞氧化损伤的保护作用
	王瑞楠; 付洋洋; 铁芳芳; 胡娜; 王洪伦; 何彦峰
	2022
发表期刊	中国中药杂志
卷号	47 期号:08 页码:2178-2186
摘要	研究胡芦巴叶黄酮组分(fenugreek leaf flavonoids, FLFs)中的主要成分及其抗氧化活性。利用溶剂萃取法对胡芦巴叶中的黄酮组分进行富集制备，采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)对其中的黄酮类化合物进行表征；同时考察FLFs对H_2O_2诱导的L02肝细胞应激损伤的保护作用，首先采用MTT法检测L02细胞活力；H_2O_2诱导L02细胞建立氧化应激损伤模型；试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)的泄漏量、还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)的活力；荧光染色法观察细胞凋亡情况；Western bolt法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK1/2)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1, HO-1)等蛋白及其磷酸化蛋白的表达水平。结合MS碎片离子信息，经数据库检索和人工解析，FLFs中含有以槲皮素和山柰酚为苷元的8种黄酮类化合物；活性研究发现，与H_2O_2处理组相比，3.125～25μg·mL~(-1)的FLFs能够提高损伤后L02细胞存活率，并且能浓度依赖性地降低L02细胞中LDH泄漏量和MDA的含量，增强GSH、SOD和CAT等酶的活性；抑制JNK和ERK1/2蛋白磷酸化水平，促进Nrf2和HO-1蛋白水平。荧光染色结果显示，H_2O_2组细胞核呈浓缩致密的强蓝色荧光，FLFs组的蓝色荧光强度明显降低。FLFs对H_2O_2所致的L02细胞氧化损伤具有保护作用，作用机制与其激活MAPKs/Nrf2/HO-1信号通路从而增强细胞清除自由基能力和改善细胞凋亡2个方面因素有关，胡芦巴叶抗氧化作用与其中含有丰富的黄酮类化合物有关。
关键词	胡芦巴叶黄酮过氧化氢 L02细胞氧化应激 MAPKs/Nrf2/HO-1
文献类型	期刊论文
条目标识符	http://210.75.249.4/handle/363003/61532
专题	中国科学院西北高原生物研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	王瑞楠,付洋洋,铁芳芳,等. 胡芦巴叶黄酮组分的制备、表征及其对肝细胞氧化损伤的保护作用[J]. 中国中药杂志,2022,47(08):2178-2186.
APA	王瑞楠,付洋洋,铁芳芳,胡娜,王洪伦,&何彦峰.(2022).胡芦巴叶黄酮组分的制备、表征及其对肝细胞氧化损伤的保护作用.中国中药杂志,47(08),2178-2186.
MLA	王瑞楠,et al."胡芦巴叶黄酮组分的制备、表征及其对肝细胞氧化损伤的保护作用".中国中药杂志 47.08(2022):2178-2186.