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题名: 水母雪莲ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选
作者: 王钧; 王建科; 石琳; 胡延萍; 杨文韬; 李毅; 王莉
刊名: 时珍国医国药
出版日期: 2016
期号: 8, 页码:1903-1906
关键词: 水母雪莲 ; ISSR-PCR ; 正交设计 ; 反应体系 ; 引物筛选
中文摘要: 目的优化并建立适合于水母雪莲的ISSR-PCR反应体系并筛选出稳定的ISSR引物。方法采用L16(45)正交设计方法,以Taq DNA聚合酶浓度、d NTP浓度、模板DNA浓度、引物浓度、Mg~(2+)浓度5种因素4个水平对水母雪莲ISSRPCR反应体系进行优化;并对反应体系进行验证。采用优化后的反应体系筛选出条带清晰且稳定的ISSR引物,通过退火温度梯度试验确定最佳退火温度。结果最终确立了水母雪莲20μl ISSR-PCR最佳反应体系,即包含Taq DNA聚合酶0.7U、d NTP 0.125mmol/L、引物0.3μmol/L、模板DNA 40ng、Mg~(2+)1.5mmol/L。在此基...
内容类型: 期刊论文
URI标识: http://210.75.249.4/handle/363003/6569
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