Knowledge Management System of Northwest Institute of Plateau Biology, CAS
| 水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选 | |
| 王建科; 李毅; 胡延萍; 石琳; 王钧; 王莉 | |
| 2017 | |
| 发表期刊 | 分子植物育种
 |
| 期号 | 8页码:3145-3152 |
| 摘要 | 以改良CTAB法提取水葫芦苗基因组DNA为模板,利用正交设计试验对影响ISSR-PCR反应体系的5个因素(TaqDNA聚合酶,dNTP,引物,模板及Mg~(2+))进行了优化筛选。经极差分析和方差分析,最终建立了水葫芦苗ISSR-PCR的最佳反应体系。结果表明,总体积20μL的反应体系中各因素浓度分别为:TaqDNA聚合酶0.025 U/μL、Mg~(2+)1.5 mmol/L、dNTP 1.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 1.5 ng/μL。通过筛选得到10条扩增条带清晰的ISSR引物,并通过梯度PCR确定了各引物的最适退火温度。在此基础上对循环次数进行优化,最终确定最佳循环次数为40次。 |
| 关键词 | 水葫芦苗 Issr-pcr 正交设计 体系优化 |
| 项目资助者 | 青海省科技计划项目(2014-NK-A4-2-1) ; 国家自然科学基金项目(31300269)共同资助 |
| 文献类型 | 期刊论文 |
| 条目标识符 | http://210.75.249.4/handle/363003/9886 |
| 专题 | 中国科学院西北高原生物研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 王建科,李毅,胡延萍,等. 水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选[J]. 分子植物育种,2017(8):3145-3152. |
| APA | 王建科,李毅,胡延萍,石琳,王钧,&王莉.(2017).水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选.分子植物育种(8),3145-3152. |
| MLA | 王建科,et al."水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选".分子植物育种 .8(2017):3145-3152. |
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| 文件名称/大小 | 文献类型 | 版本类型 | 开放类型 | 使用许可 | ||
| 水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物（1573KB） | 期刊论文 | 作者接受稿 | 开放获取 | CC BY-NC-SA | 浏览 下载 | |
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